ПЦР в реальном времени (Real-Time PCR) - это вариант полимеразной цепной реакции (ПЦР), который позволяет одновременно усилить и мониторить процесс амплификации генетического материала в режиме реального времени. В отличие от обычной ПЦР, где результаты обнаруживаются после завершения реакции, анализ в реальном времени позволяет наблюдать и количественно измерять аккумуляцию амплифицированной ДНК или РНК на протяжении каждого цикла амплификации.
Принцип работы анализа в реальном времени основан на использовании специальных флуоресцентных молекул, называемых пробами или примесями (пробы), которые маркируют амплифицированный генетический материал. Эти пробы содержат специфические флуоресцентные метки, которые выделяют свет во время ПЦР-реакции, и детекторы, которые регистрируют этот свет.
В реальном времени амплификация генетического материала сопровождается увеличением интенсивности флуоресценции, которая коррелирует с количеством начального генетического материала в образце. По мере того, как реакция прогрессирует, количество амплифицированного материала становится достаточным для обнаружения света, и ПЦР-аппарат регистрирует его в режиме реального времени. Измерение света сопровождается построением кривой амплификации, которая отражает изменения количества амплифицированного материала в течение циклов.
ПЦР в реальном времени является мощным инструментом для количественной оценки генетического материала и может использоваться в различных областях, таких как исследования генных выражений, генетика, микробиология, медицинская диагностика и др. Этот метод позволяет получать более точные и количественные данные о наличии и концентрации генетических материалов, чем обычные методы анализа ПЦР.